Luisana s-a nascut pe 18 mai 1987, in Buenos Aires, Argentina. Este sora actorului Darío Lopilato, are o sora, Daniela Lopilato.
Parintii i-au spus Luisana deoarece mama ei, pe cand era insarcinata, urmarea o telenovela a carei protagonista se numea astfel. Au trecut doi ani pana cand Registrul Civil a acceptat acest nume si, in sfarsit, fetita a avut o identitate oficiala. Incepand de la acea varsta, s-a numit Luisana Loreley Lopilato, iar cei apropiati o striga Luli sau Lu. Luisana a fost dintotdeauna o cocheta.
Cand era mica, plangea ore intregi dupa ce sora sa, Daniela, mai mare cu cativa ani, iesea in oras aranjata. A intrat in lumea show-biz-ului de la cinci ani, cand a facut primele reclame. A inceput sa mearga la castinguri si Cris Morena (producatoarea telenovelelor Chiquititas si Rebelii) a selectat-o, intr-un final, pentru ca se saturase sa-i tot spuna ca n-a luat preselectia si Luli sa se prezinte senina la urmatoarea. Telenovela Rebelde i-a adus faima nationala si internationala.
A debutat la televiziunea argentiniană in 1995, in serialul Mi familia es un dibujo, din 1999 până in 2001 a jucat in telenovela Chiquititas, in 2001 juca in Chiquititas: Rincón de luz, Chiquititas, la historia.
In anul 2002, împreună cu Camila Bordonaba, Benjamin Rojas, Felipe Colombo a jucat in serialul de televiziune Rebelde Way si au creat formația rock Erreway. In film, Luisana Lopilato a interpretat rolul Miei Koluchy. Formația a avut succes in America Latina si in Europa, au inregistrat CD-urile Seńales (2002), Tiempo (2003), Memoria (2004). In anul 2004, formația s-a destrămat, actrița a primit oferte sa pozeze pentru revistele Gente si Maxim. A fost model al firmelor 47 Street, Promesse, Loreal.
Luisana Lopilato s-a clasat in anul 2009 pe locul 86 in Top 100 al celor mai sexi femei din lume realizat de revista FHM din Spania, in anul 2010 s-a clasat pe locul al 17-lea in același top.
S-a căsătorit la 31 martie 2011 cu cântărețul canadian Michael Buble.
