James Denton s-a născut la 20.01.1963, în Nashville, Tennessee, SUA. Al doilea dintre cei trei copii ai lui JT Denton (1930–1993), dentist care a servit în armată și al soției lui, care a murit de cancer la sân, în 2002. Denton a crescut baptist, și a cântat la Westmoreland United Methodist Church din Westmoreland, Tennessee. El a absolvit Goodlettsville High School și a urmat Universitatea din Tennessee, unde a fost membru al fraternității Sigma Alpha Epsilon. S-a specializat în Televiziune/Jurnalism și a obținut o diplomă în Publicitate. A vândut reclame pentru două posturi de radio. A început să joace la 23 de ani, la un teatru comunitar din Nashville. În timp ce locuia la Chicago, a interpretat rolul Stanley în piesa A Streetcar Named Desire, rolul Bebert în farsa franceză Lapin Lapin. Denton a fost membru al companiei The Griffin Theatre și la Strawdog Theatre Ensemble. El a fost protagonist în Flesh and Blood, cântând și compunând muzica pentru The Night Hank Williams Died, portretizând predicatorul din Kentucky CC Showers în The Diviners, care i-a adus o nominalizare pentru cel mai bun actor Joseph Jefferson Award (singurul premiu de teatru din Chicago). După ce s-a mutat la Los Angeles, Denton a continuat să cânte pe scenă, de obicei în timpul pauzei de la orice serial TV de care era atașat în acel moment. Mai multe piese de teatru și filme independente în care a apărut Denton, au fost scrise de prietenul său, Mike Petty. De exemplu, în In Walked Monk, el a jucat rolul lui Steven, în vara lui 1999, și în Locked Up Down Shorty s, rolul Danny, în vara lui 2001. La televiziune, s-a remarcat în rolul Mike Delfino din serialul Desperate Housewives (2004–2012), în rolul Dr. Sam Radford din serialul Good Witch (2015–2021). El a jucat în filme, precum: That Old Feeling (1997), Face / Off (1997), Primary Colors (1998), Assumption (2006), Beautiful Dreamer (2006), Undead or Alive (2007), Custody (2007), Tortured (2008), All-Star Superman (2011). A apărut în diverse emisiuni de televiziune, printre care: Sliders, Dark Skies, Two Guys and a Girl, Ally McBeal, The West Wing, JAG, The Pretender, Philly, The Drew Carey Show, Reba. În 2003, el a interpretat rolul principal al agentului special John Kilmer în serialul Threat Matrix. În 2016, a avut rolul Peter Hudson în serialul de comedie-dramă Devious Maids. În 2018, a făcut o apariție ca oaspete în rolul căpitanului Navy Deckard în serialul de televiziune NCIS: New Orleans, în episodul Checkmate, Part 2. Denton cântă la chitară în trupa de cover-uri de caritate Band de la TV. Ei donează veniturile din spectacolele și înregistrările lor către organizațiile de caritate alese. În plan personal, Denton s-a întâlnit cu cântăreața de muzică country Deana Carter la liceu. A fost căsătorit cu Jenna Lyn Ward, din 1997 până în 2000. Pe 16 decembrie 2002, Denton s-a căsătorit cu Erin O'Brien, antrenor personal la Life Time Fitness. Au un fiu, născut în 2003, și o fiică, născută în 2005. Cuplul a locuit în Glendale, California, iar după terminarea Desperate Housewives, familia s-a mutat în Chanhassen, Minnesota. Denton a sprijinit Angel Foundation, o organizație nonprofit cu sediul în Minnesota, care servește adulții bolnavi de cancer și familiile acestora.