Lily Gladstone s-a născut la 02.08.1986, în Kalispell, Montana, SUA. A crescut în Browning și East Glacier, Montana. Ea este de moștenire Piegan Blackfeet, Nez Perce și europeană și a crescut în rezervația Națiunii Blackfeet. Pe linie maternă, ea este verișoară îndepărtată a lui William Ewart Gladstone, prim-ministrul britanic. Unul dintre stră-străbunicii ei paterni a fost Red Crow, un șef al Națiunii Kainai. După ce a absolvit Mountlake Terrace High School din Mountlake Terrace, Washington, ea a urmat Universitatea din Montana, absolvind în 2008 cu diplomă în actorie/regie și în Studii native americane. Lily Gladstone s-a mutat la Seattle, unde a fost înscrisă la Stone Soup Theatre, o companie de teatru educațional pentru tinerii din Seattle, după care a jucat în filme studențești. Ea și-a făcut debutul în filmul Jimmy P: Psychotherapy of a Plains Indian (2012) și a colaborat cu cineastul Kelly Reichardt la filmele independente Certain Women (2016) și First Cow (2019). Interpretarea lui Jamie, fermier, din Certain Women, i-a adus o nominalizare la Independent Spirit Award pentru cea mai bună actriță în rol secundar, și o nominalizare la Gotham Independent Film Award pentru Breakthrough Actor, dar și premiul Asociației Criticilor de Film din Los Angeles și Premiul Boston Society of Film Critics pentru cea mai bună actriță în rol secundar. Gladstone a apărut în episoade din Room 104 (2017–2020), Showtime’s Billions (2016–2023), Reservation Dogs (2021–2023). Ea a mai jucat în Winter in the Blood (2012) și Buster's Mal Heart (2016). Gladstone a lucrat la compania Oregon Shakespeare Festival în 2017 și a jucat în producția Yale Repertory Theatre din Manahatta a lui Mary Kathryn Nagle, în 2020. Ea a fost distribuită în rolul principal Mollie Burkhart din filmul lui Martin Scorsese, Killers of the Flower Moon, alături de Leonardo DiCaprio, Jesse Plemons, Brendan Fraser și Robert De Niro (2023).