Miriam Margolyes s-a născut la data de 18.05.1941, în Oxford, Anglia, Marea Britanie. A studiat la Liceul Oxford, la Colegiul Newnham, Cambridge. A fost singurul copil al lui Joseph Margolyes (1899–1995), un medic generalist scoțian din zona Gorbals din Glasgow, și al dezvoltatorului imobiliar Ruth (născută Sandman; 1905–1974), fiica unui dealer de mobilă second-hand și a unui licitator la Kirkdale, Liverpool, care s-a mutat ulterior la Londra. Numele familiei materne s-a schimbat din Sandeman în Walters înainte de nașterea lui Margolyes. Ea a crescut într-o familie de evrei, cu strămoși care s-au mutat în Marea Britanie din Belarus și Polonia. Străbunicul ei matern, Symeon Sandmann, s-a născut în orașul polonez Margonin, pe care Margolyes l-a vizitat în 2013. Bunicul lui Margolyes s-a născut în Amdur (acum, Indura) în Belarus, care la acea vreme făcea parte din Imperiul Rus. Miriam a devenit actriță de teatru și film, scriitoare, activistă politică și personalitate de televiziune britanico-australiană. Cu vocea ei versatilă, Margolyes a câștigat pentru prima dată recunoașterea pentru munca ei ca artist vocal. În anii 1970, ea a înregistrat un audio soft Sexy Sonia: Leaves from my Schoolgirl Notebook. Ea a interpretat majoritatea personajelor feminine secundare din serialul TV de acțiune japonez Monkey. A lucrat, de asemenea, cu compania de teatru Gay Sweatshop și a oferit voci off în serialul TV japonez The Water Margin (creditat ca Mirium Margolyes). În 1974, a apărut în serialul de comedie The Betty Witherspoon Show. Primul rol important al lui Margolyes într-un film a fost ca Elephant Ethel în Stand Up, Virgin Soldiers (1977). În anii 1980, ea a făcut apariții în Blackadder, Blackadder II, Crăciunul lui Blackadder (rolul regina Victoria). În 1986, ea a jucat un rol secundar în drama The Life and Loves of a She-Devil. A câștigat în 1989 premiul LA Critics Circle pentru cea mai bună actriță în rol secundar pentru interpretarea Florei Finching în filmul Little Dorrit (1988). În 1989, Margolyes a co-scris și interpretat un spectacol cu o singură femeie, Femeile lui Dickens, în care a interpretat 23 de personaje din romanele lui Dickens. Ea a găzduit un documentar în zece părți, Dickens in America, care a relatat călătoria lui Dickens din 1842 prin Statele Unite ale Americii. La televiziunea americană, ea a apărut în sitcomul din 1992, Întoarcerea lui Frannie. În 1994, a câștigat premiul BAFTA pentru cea mai bună actriță în rol secundar, doamna Mingott din filmul lui Martin Scorsese, The Age of Innocence (1993). A interpretat pe profesorul Sprout în seria de filme Harry Potter (2002–2011). Ea este cunoscută și pentru serialul Sună la moașă (2018-2021). Margolyes a primit titlul de Ofițer al Ordinului Imperiului Britanic (OBE) în 2002, pentru activitate dramatică. După ce și-a început cariera în teatru, ea și-a făcut debutul în film în comedia britanică A Nice Girl Like Me (1969). De atunci, a apărut în Reds (1981), Yentl (1982), Little Shop of Horrors (1986), Little Dorrit (1988), Romeo+Juliet (1996), Being Julia (2004). Ea este cunoscută și pentru rolurile vocale din Babe (1995), James and the Giant Peach (1996), Mulan (1998), Happy Feet (2006), Flushed Away (2006), Early Man (2018). S-a remarcat și în aparițiile sale la televiziune, inclusiv în Cold Comfort Farm (1995), Vanity Fair (1998), The Life and Death of Peter Sellers (2004), unde a jucat rolul lui Peg Sellers, mama lui Peter Sellers. Apoi, a făcut parte din distribuția originală a producției londoneze a musicalului Wicked alături de Idina Menzel, în 2006, jucând Madame Morrible, rol pe care l-a jucat din nou pe Broadway în 2008. În 2009, a apărut într-o nouă producție Endgame de Samuel Beckett la Duchess Theatre din West End. Margolyes a exprimat rolul doamnei Plithever, un șarpe orb, în filmul epic de animație Legend of the Guardians: The Owls of Ga'Hoole (2010). În 2011, ea a înregistrat o narațiune pentru albumul The Devil's Brides a muzicianului-etnograf Klezmer Yale Strom. În 2014, a dat voce lui Nina în serialul animat Nina Needs to Go ! Ea este cunoscută și pentru rolurile sale recurente ca Prudence Stanley din serialul australian Miss Fisher's Murder Mysteries (2012-2015) și pentru sora Mildred din serialul Call the Midwife (2018-2021). Ea a jucat în producții atât în Regatul Unit, cât și în Australia, inclusiv în show-ul ei din 1989 pentru femei Dickens' Women și în premiera australiană a piesei din 2013, I'll Eat You Last. Margolyes și-a petrecut mulți ani împărțindu-și timpul între Regatul Unit, Australia și Italia. Ea a devenit cetățean australian în 2013. A scris și două cărți, Dickens' Women (2012) și autobiografia ei, This Much is True (2021). În ianuarie 2016, Margolyes a apărut în The Real Marigold Hotel, un documentar de călătorie în care un grup de opt celebrități au călătorit în India pentru a vedea dacă pensionarea ar fi mai plină de satisfacții acolo decât în Marea Britanie. Seria a fost reluată pentru două speciale de Crăciun, The Real Marigold On Tour, din Florida și Kyoto. Ea a povestit documentarul din 2016 despre Lady Colin Campbell, intitulat Lady C and the Castle. În decembrie 2017, Margolyes a apărut în al doilea sezon din The Real Marigold în turneu la Chengdu și Havana. A apărut în primul episod al celui de-al treilea serial, în care a călătorit la Sankt Petersburg. În ianuarie 2018, Margolyes a găzduit un serial în trei părți pentru BBC, intitulat Miriam's Big American Adventure, evidențiind cetățenii Statelor Unite și problemele cu care se confruntă țara. Din 2018, Margolyes a interpretat-o pe mama Mildred în drama Call the Midwife. A jucat-o pe Miss Shepherd într-o producție din 2019, The Lady in the Van, pentru Melbourne Theatre Company, din Melbourne, Australia. În 2021, ea a jucat-o pe Lillian în sitcomul Charlotte and Lillian, unde și-a prezentat autobiografia This Much Is True. La 5 noiembrie 2021, a apărut la BBC One The Graham Norton Show, unde și-a prezentat autobiografia This Much Is True, explicând că a fost scrisă doar pentru că „a fost plătită cu o sumă enormă de bani”. În plan personal, Margolyes este lesbiană. Din 1968, ea a fost într-o relație cu Heather Sutherland, o profesoară australiană de studii indoneziene, acum pensionată. Ele își împart timpul între casele din Londra și Kent în Anglia, Robertson în Australia și Montisi în Italia. Margolyes este un patron al My Death My Decision, o organizație din Marea Britanie, care caută o abordare mai plină de compasiune a morții, inclusiv dreptul legal la o moarte asistată medical, dacă aceasta este dorința persistentă a unei persoane. Margolyes este o susținătoare a Sense (Asociația Națională pentru Surdoorc și Rubeola) și a fost gazda primelor Premii Sense Creative Writing, desfășurate la Muzeul Charles Dickens din Londra în decembrie 2006, unde a citit o serie de lucrări scrise de persoane cu surdocecitate talentate. În aprilie 2022, Margolyes a fost subiectul documentarului BBC Miriam Margolyes: Up for Grabs in the Imagine...series, unde a fost intervievată de Alan Yentob. În noiembrie 2022, s-a dezvăluit că Margolyes a fost înscrisă pentru a apărea în programul special de aniversare a 60 de ani de la apariția seriei Doctor Who.