Samuel Johnson s-a nascut in 1978, in Daylesford, Victoria, Australia.
La varsta de 14 ani, dintr-un impuls, a dat o auditie pentru rolul unui om de stiinta nebun in The Pink Panther Strikes Again, castigand auditia si aprecierea regizoarei Ronda Schepisi, care i-a aranjat un contract cu Actor's Equity. A continuat sa joace in numeroase filme de televiziune si piese de teatru, insa cel mai mare succes l-a obtinut cu rolul din soap-opera The Secret Life of Us, rol pentru care a castigat un premiu AFI Award pentru cel mai bun actor. In 2003 a castigat din nou premiul AFI Award pentru rolul din miniseria After the Deluge.
Samuel Johnson si-a castigat reputatia ca fiind unul dintre cei mai ocupati actori din Australia. Concomitent cu actoria, Johnson e cunoscut si ca voice-over pentru televiziunea australiana, pentru numeroasele reclame comerciale in care a aparut si pentru activitatea in radio.
In 2007 Johnson a fost implicat intr-o altercatie intr-un bar din Sydney, cu una dintre persoanele aflate in bar. Avocatii apararii lui Johnson au invocat in apararea acestuia ca la data incidentului, Johnson lua medicamente anti-depresive ca urmare a pierderii logodnicei sale in urma cu un an, Lainie Woodlands, care s-a sinucis. Johnson a primit 12 luni de munca in folosul comunitatii.
