A absolvit liceul Dr. Martin LeBoldus in 2003. A participat la scenetele realizate in scoala si la Improv Games (teatru improvizat). Maslany este una din vedetele serialului canadian 2030 CE si si-a mai castigat recunoasterea cu rolul Fantomei din Ginger Snaps 2.
Este membra a grupului Naivi Comuni ai Teatrului Improvizat (General Fools Improvisational Theatre) si a grupului Anoetic Improv. In 2010 a interpretat-o pe Fecioara Maria in serialul din 4 parti The Nativity, unde a jucat alaturi de Andrew Buchan care a primit critici excelente.
Maslany a primit un premiu la Festivalul de Film Sundance din 2010 pt rolul lui Ruby din Grown Up Movie Star. In 2011 a jucat rolul unui asasin platit, Clara Rinker, in Certain Prey, adaptare omonima a volumului ce-i apartine lui John Sandford. L-a avut ca partener pe eroul din NCIS, Mark Harmon.