Yolande Moreau a crescut în Belgia unde a primit o educație catolică conservatoare. După ce a trăit o viață mai libertină în adolescență, a plecat să studieze la școala LECOQ în Paris, manifestând un interes puternic pentru actorie și teatru. În 1982, ea frecventează cursuri de expresivitate teatrală în timp ce începuse să scrie Sale Affaire, un mister despre iubire și crimă. În 1985, regizoarea Agnes Varda o remarcă pe scena Festivalului de teatru Avignon și îi oferă primul rol într-un film în Sans tott nt lot. Patru ani mai târziu se alătură grupului de teatru Jerome Deschamps. În 2001 interpretează rolul receptionistei lui Amelie Poulain, filmul de succes al lui Jean-Piere Jeunet. În 2003, ea joacă în comedia Ze Film de Guy Jacques, în Folle Embelte de Dominique Cabrera și în Bienvenue chez les Rozes de Francis Pallau. În 2004, co-regizează primul ei lung-metraj, Quand la mer monte, cu prietenul ei, regizorul de imagine Gilles Porte. Ea interpretează rolul lui Irene, o reprezentație marcantă a unei actrițe ce călătorește în nord și care îl întâlnește pe Dries. Câștigă un Cesar pentru cea mai bună actriță pentru interpretarea sa. Academia franceză de film i-a acordat filmului încă un Cesar pentru cel mai bun film de lung-metraj, ce îl împărtășește cu Gilles Porte.
Yolande Moreau a mai jucat în numeroase filme de televiziune prestigioase și este o actriță de teatru realizată.